便携微生物检测仪微生物培养的方法

不同种类微生物的培养需要使用不同的培养基。同时一种微生物也可以通过多种的培养基和培养方法进行培养。这样主要介绍使用微生物检测仪的各种不同培养方法。
1.滤膜法
滤膜是一种微孔性薄膜。将水样注入已灭菌的放有滤膜（孔径0.45μm）的抽滤装置中，经过抽滤，细菌会被截留在膜上，然后将滤膜贴于相应细菌的培养基上，进行培养。经过培养后，滤膜上会根据不同的培养基，出现各种不同的菌落。计算滤膜上生长的菌落数，可计算出每1L水中含有的各种细菌的菌群数。滤膜法具有高度的再现性，可用于检验各种水样，能比多管发酵法更快的获得肯定的结果。
1.1滤装置
抽滤装置包括电池、真空泵、斗式过 滤杯、中间砂心过滤头（烧结滤头）、三角集液瓶以及不锈钢制固定夹。以无菌操作，依照右图把装置安装起来。
1.2水样过滤
用无菌镊子（火焰灭菌器灭菌）夹取灭菌滤膜边缘，贴在已灭菌的烧结滤头（火焰灭菌器灭菌）上，夹好抽过滤杯。将适量的水样注入过滤杯中，加盖，开支真空泵，把水中的所有细菌抽滤在滤膜的表面。
1.3细菌培养
将滤膜移到培养皿里已被相应培养基浸润的吸收垫上，在移动培养箱内进行培养。
1.4结果观察与报告
计算滤膜上生长的菌群菌落个数，根据过滤水样的量，计算1L或100ml水样中菌群数。
2.酶底物法
酶底物法为GB5750-2006收录的用于大肠菌群及大肠埃希氏菌检测标准方法，酶底物法是目前水中总大肠菌群及大肠埃希氏菌检测的最先进方法。以其方便快捷，假阳性低，适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高，检测时间可减少到24小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景，可及时检测，预防，最大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。
2.1操作步骤：
用 100 mL的无菌稀释瓶量取 100 mL 水样，加入一管酶底物法培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解。准备 10 支10ml适当大小的灭菌试管，用无菌吸管分别从上述稀释瓶中吸取10mL水样至各试管中，放入培养箱中培养24 h。
2.2结果观察与报告：
大肠菌群：将培养 24 h之后的试管取出观察，如果试管内水样变成黄色则表示该试管含有总大肠菌群。计算有黄色反应的试管数，对照下表1查出其代表的总大肠菌群最可能数CMPN）。 结果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未产生黄色，则可报告为总大肠菌群未检出。
表1   不同阳性结果的最可能数（MPN）及 95%可信范围

阳性试管数	总大肠菌群(MPN/100ml)	95%可信范围
		下限	上限
0	＜1.1	0	3.0
1	1.1	0.03	5.9
2	2.2	0.26	8.1
3	3.6	0.69	10.6
4	5.1	1.3	13.4
5	6.9	2.1	16.8
6	9.2	3.1	21.1
7	12	4.3	27.1
8	16.1	5.9	26.8
9	23	8.1	59.5
10	＞23.0	13.5

大肠埃希氏菌：将培养24h颜色变成黄色的水样的试管，在暗处用紫外灯观察，如果有蓝色荧光产生则表示有大肠埃希氏菌。计算有荧光反应的试管数，对照表1 查出其代表的大肠埃希氏菌最可能数MPN）， 结果以MPN/100 mL 表示。 如所有管未产生蓝色荧光，则可报告为大肠埃希氏菌未检出。